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微生物實驗室干粉培養基的管理

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在微生物檢驗中,培養基的質量關乎微生物的檢驗結果。加強對培養基的質量管理,能夠有效提升微生物檢驗結果的準確性和科學性,因此需要注重培養基的質量管理工作。本文從培養基的采購驗收、質量控制、培養基制備后的質量控制以及培養基的滅菌和儲存等環節簡要分析了培養基的質量控制工作。

01培養基供應商選擇

培養基應當從可靠的供應商處采購,必要時應當對供應商進行評估。評估應確定其生產工藝,運輸條件是否符合規定,資質是否齊全,質量保證能力和生產能力是否符合需求。如果新增培養基供應商,應對該廠家所生產的不同批次的培養基理化及微生物指標進行檢測,并進行審計評估,評估合格后才可以將該品牌納入合格供應商名錄。

 

02培養基初步驗收

在培養基到達實驗室后,應安排專業的人員對培養基進行驗收,首先查看培養基的名稱是否正確、配方是否符合藥典或國標等相應的法規文件的要求、是否臨近有效期、生產批號是否清晰、能否提供商品質檢報告、檢查包裝是否完整,規格、數量是否與采購申請一致。在接收完畢后安排管理人員進行入庫保存,并盡快安排對培養基進行入廠檢測。

 

03培養基理化及微生物檢測

培養基的理化指標主要包括pH值、澄明度以及凝膠強度(瓊脂類),培養基的微生物指標一般包括:靈敏度、促生長能力、抑制能力以及指示特性,即培養基適用性檢查。這些指標供應商在培養基出廠前就已經進行了檢測,合格后放行。使用單位驗收時仍需進行培養基適用性檢查,并與廠家提供的質檢報告進行對比,看與報告內容是否一致。使用單位也可采用有資質的第三方檢測報告。

04干粉培養基儲存

對入庫保存的培養基應張貼標簽,以區分驗收與未驗收的培養基,避免混淆與差錯。在此為大家提供一個簡單的標簽,僅供參考:

 

使用單位存儲培養基時標簽也可以做編號處理,例如購進100TSB,產品號為11104,其編號為11104-100-1、11104-100-2、...、11104-100-100按照流水號領用培養基,可減少對培養基的盤點,方便管理。

培養基的儲存條件一般為常溫、干燥、密閉,當然不同供應商的存儲條件稍有差別,按照標識執行即可。稱量后應及時旋緊瓶蓋,避免后期存儲因空氣濕度較大受潮或結塊,如出現結塊現象,該瓶培養基不可繼續使用。

培養基開瓶后在稱量和存儲的過程中會不可避免的吸收空氣中的水分,而水分含量的增加,培養基的微生物負載可能亦隨之增大,進而影響到干粉培養基的質量。所以干粉培養基在開瓶后,應定期進行復檢,并對復檢結果進行統計分析,確定開瓶有效期。

如果實驗室所在地區濕度較大(相對濕度高于75%),開瓶后的培養基應采取適宜的保護措施,如果數量較少,可放置于干燥器內,如果數量較多,可使用封口膜瓶口位置纏繞數匝。

 

05培養基配制--稱量

 

培養基的制備環節,應當嚴格按照培養基配方制備,在培養基的稱量過程中,建議在干爽、無風的區域或者通風柜中進行,這樣能夠避免培養基吸潮使稱量結果不準。應當選擇靈敏度較高的稱重天平,這樣能夠保證稱量的準確性,同時稱量過程中要選擇專用的稱量匙,避免其他雜質混入培養基中。操作人員應當對稱量過程進行詳細的記錄,記錄中應該體現培養基名稱、批號、稱量數量、具體配制方法、制備人姓名日期、復核人姓名日期等信息,方便后期的溯源調查。

 

06培養基配制--容器和水

配制培養基所用的容器不得影響培養基質量,一般為玻璃容器,培養基配制所用的容器和配套器具應潔凈,可用純化水沖洗玻璃器皿以消除清潔劑和外來物質殘留。在大體積配制培養基時,企業也可根據自己的情況采用不銹鋼容器,建議專鍋專用,且容器應潔凈。不建議使用陶瓷或搪瓷容器。

培養基用水是培養基制備過程中非常重要的一個物質。不可以使用自來水,自來水中的雜質可能會對檢驗結果有一定的影響。許多法規在培養基配方中采用蒸餾水作為配制用水,實際上純化水的潔凈程度不差于蒸餾水,甚至更優,所以不必單獨制備蒸餾水,直接使用純化水即可,配制用純化水應按藥典的要求定期進行檢測。

在制備過程中,可先加入培養基,再將純化水倒入容器內,同時需要將器具內壁上的培養基粉末一同帶到容器中,然后根據說明書的要求進行操作。涉及到大體積配制后要分裝的培養基(例如TSA、TSB、FTM等),分裝前一定要將培養基加熱至完全溶解,避免后續可能會出現的瓶間差異。

 

07

培養基的滅菌

培養基的滅菌過程是影響培養基質量的關鍵環節。大部分培養基需要高溫高壓濕熱滅菌,但部分選擇性培養基由于一些組分不可高溫高壓滅菌,所以會采用煮沸滅菌,因此滅菌前應閱讀培養基使用說明。 

 

培養基滅菌應采用驗證過的滅菌程序,滅菌參數應通過無菌性試驗和促生長試驗的驗證。此外,對高溫高壓滅菌器的蒸汽循環系統也要加以驗證,以保證其在一定裝載方式下的正常熱分布。溫度緩慢上升的高壓滅菌器可能導致培養基過度加熱,過度滅菌會影響絕大多數的細菌和真菌培養基的促生長質量。滅菌器中培養基的容積和裝載方式也會影響加熱的速度。因此應根據滅菌培養基的特性,進行全面的滅菌程序驗證。

煮沸滅菌的培養基建議現配現用,高溫高壓濕熱滅菌的培養基可以大量配制,在適宜的條件下儲存,固體培養基滅菌后只允許一次再融化。滅菌后培養基的儲存效期應進行驗證。

制備好的培養基,使用前需進行pH的監測。對于固體培養基pH監測,可使用平頭電極或固液兩用電極。

 信息來源:https://mp.weixin.qq.com/s/SqRhmYI6_K8tWc_mkVF7UQ

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