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微生物日常檢測過程中常見問題解決小技巧!

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在微生物檢測中常會遇到以下問題,可用以下解決方案



為什么劃不出單個菌落?

1)平板上有過多的水分;

2)在劃線時沒有反復灼燒接種環;

3)多區劃線,三區或四區劃線,越是稀釋到4區,間距要越寬。

 

 

培養基配制時應注意的問題

①嚴格控制滅菌溫度,需要按照要求進行滅菌操作。如果培養基的含糖量較高,那么滅菌溫度就不能太高,否則就會使糖分焦化,從而影響培養基的質量。

②不能反復融化瓊脂培養基,這會對培養基中的營養成分產生破壞。

③不能對培養基進行反復滅菌,這同樣也會對營養成分產生破壞作用。 

④在對瓊脂培養基進行滅菌后需要將其充分搖勻。

⑤需要將培養基完全溶解才能分裝培養基。

培養基的保存

1)平板:大多數平板如VRBA、DC、尿素酶生化管、顯色系列等要避光低溫保存。

2)干粉培養基:避光干燥,結塊后不能使用。

3)亞碲酸鉀卵黃增菌液、50%卵黃乳液等:冷凍保存,使用時,要常溫解凍,不能使用水浴加熱。

4)抗生素類:冷藏保存,溫度過高會導致靈敏度的下降。

5)兔血漿:冷藏保存少量的紅色不會影響結果。

觀察時間的掌握

SN、GB等標準或培養基的使用說明所述時間進行觀察,時間過短或時間過長,單菌落的特征都不會很明顯。如單增李斯特氏菌顯色培養基,時間短單菌落看不到卵磷脂環,時間長綿羊李氏菌也會產生沉淀環。OXA、PALCAM的觀察也如此,時間過長,李氏菌使整個平板成黑色,不利于觀察單個菌落。霉菌要3天后要及時觀察計數,防止時間長成一片。

添加劑的添加

1)溫度的掌握:卵黃和抗生素類添加的溫度都不應太高。

2)定量: 過多會抑制一些目標菌,太少又導致雜菌的過度生長。

培養溫度的掌握

1)真菌類:25-28℃培養

2)細菌類:李氏菌在增菌和生化中要求培養溫度在30℃左右。

3)其他一般在36℃左右

 

常用的接種方法

穿刺接種、傾注接種、涂布接種、劃線接種。

 信息來源:https://mp.weixin.qq.com/s/bftpyIgOQiZ_vShJyatG1w

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